摘要: 目的　开展信号转导及转录激活因子 3（STAT3）蛋白在原核系统内进行表达，筛选出不同诱导温度、IPTG 浓度 下最佳的表达条件，并进行大量表达纯化，获得 STAT3 纯化蛋白，为 STAT3 蛋白功能研究奠定基础。方法　利用大肠杆菌系 统表达 STAT3，转化至 Rosetta-gami (DE3) pLysS、 Rosetta-gami 2 (DE3)、 BL21 (DE3)，经 IPTG 诱导表达，优化表达条件。最 后通过 Ni-NTA 琼脂糖纯化树脂纯化和分子排阻层析技术进一步纯化蛋白。结果　将 STAT3 质粒成功转化至 BL21 (DE3) 感受 态细胞并优化出最佳表达条件为 16 ℃、0.2 mM IPTG 诱导 18 h，利用 His 标签与钴亲和层析填料柱结合纯化出目的蛋白，最后 运用 ÄKTA pure 层析系统进一步纯化。结论　成功表达出 STAT3 蛋白，筛选出最佳的诱导条件和蛋白纯化条件，为后续进一 步筛选靶向 STAT3 的天然产物及结构功能研究奠定基础。