摘要: 目的　TRIM25 蛋白在原核系统内进行表达，筛选最佳的纯化条件，并进行大量表达纯化。方法　利用大肠杆菌 系统表达 TRIM25，转化至 Rosetta-gami (DE3) pLysS、 Rosetta-gami 2 (DE3) 和 BL21 (DE3) 感受态细胞，经 IPTG 诱导表达， 通过 GST 填料纯化和分子排阻层析技术进一步纯化蛋白。结果　将 TRIM25 质粒成功转化至 BL21 (DE3) 感受态细胞，表达条 件为 16 ℃、0.4 mM IPTG 诱导 18 h，并对纯化条件进行了大量的摸索，通过对纯化条件的多次优化之后，最后确定了分子筛 buffer 为 50 mM HEPES pH 7.5， 300 mM NaCl， 1 mM DTT。结论　成功表达出 TRIM25 蛋白，筛选出最佳纯化条件，为后续 进一步筛选靶向 TRIM25 蛋白的天然产物及结构功能研究奠定基础。